Качество эмбриона и развитие ребенка
Популярные вопросы и ответы. ЭКО
Уважаемые читатели! Сегодня мы публикуем на нашем сайте очередную серию ответов на ваши самые популярные вопросы об ЭКО. Отвечает генеральный директор клиники, кандидат медицинских наук, врач высшей категории, Елена Игоревна Померанцева
Какие эмбрионы лучше: 3-хдневные или 5-тидневные?
Если получилось мало эмбрионов, нужно ли их доращивать до 5 суток?
На начальных этапах развития экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) эмбрионы переносили в полость матки на 1е и 2-е сутки после проведения пункции. К настоящему времени наука шагнула далеко вперед и в лаборатории можно создать оптимальные условия для культивирования эмбрионов до стадии бластоцисты (5-е сутки развития). Это стало рутинной практикой благодаря внедрению нового оборудования, такого как мультигазовые инкубаторы, а также новых сред для культивирования эмбрионов.
Перенос эмбрионов в матку на стадии бластоцисты повышает шанс наступления беременности по сравнению с переносом эмбрионов на более ранних стадиях. Культивирование эмбрионов до 5х суток является своеобразной селекцией, поскольку не все эмбрионы достигают стадии бластоцисты.
Однако не всем пациенткам можно рекомендовать этот метод. У пациенток со сниженным овариальным резервом, тяжелым мужским фактором высок риск отмены переноса эмбрионов из-за того, что эмбрионы не смогут достигнуть стадии бластоцисты при культивировании in vitro. Следует также отметить, как бы мы ни пытались в лаборатории создать для эмбриона условия максимально приближенные к естественным (in vivo), мы не сможем их воссоздать на все 100%. При культивировании in vitro мы лишь обеспечиваем оптимальный температурный режим, газовый состав окружающей среды, снабжаем эмбрион питательными веществами. В полости матки помимо прочего, эмбрионы получают различные ростовые факторы и клеточные сигналы от окружающих тканей. Исходя из того, что в полости матки эмбрионы получают наиболее оптимальные условия для своего развития, клиники ВРТ практикуют перенос как на 3-и, так и на 5-е сутки развития эмбриона.
Хорошие и отличные эмбрионы — в чем разница? Как их качество влияет на будущего ребенка?
Чем лучше качество эмбрионов, тем выше шанс наступления беременности. Именно поэтому, для переноса в полость матки отбираются эмбрионы с наилучшими морфологическими характеристиками.
Однако иногда бывает, что наилучшими из всего пула эмбрионов являются эмбрионы среднего или низкого качества. Не стоит отчаиваться. Даже в таком случае возможно наступление беременности и рождение здорового ребенка. К настоящему времени не установлено корреляции между качеством эмбриона и здоровьем ребенка.
Почему переносят 2 эмбриона?
При переносе в полость матки двух эмбрионов шанс наступления беременности в среднем повышается на 15%. Следует также учесть, что риск многоплодия также повышается. В том случае, если у пациентки имеются медицинские противопоказания к вынашиванию многоплодной беременности, то следует выполнить селективный перенос одного эмбриона.
Если один эмбрион прижился, а второй нет, что происходит с тем, который не прижился?
К сожалению, не все эмбрионы дают начало новой жизни. Эмбрион, который не имплантировался, мог погибнуть еще до начала процесса имплантации, что может быть связано с генетическими аномалиями самого эмбриона.
Показано, что до 60% эмбрионов человека могут иметь те или иные генетические поломки. Однако не следует забывать, что сам процесс имплантации также довольно сложен. И даже перенос в полость матки генетически нормально эмбриона отличного качества не гарантирует беременность. Принимающая среда – эндометрий –должна обладать морфологической, биохимической, рецепторной зрелостью. Имплантация – также сложный иммунологический процесс, поскольку эмбрион является чужеродным для организма матери. Любые отклонения могут привести к негативному исходу программы ЭКО.
По Законодательству, в нашей стране разрешено переносить 2 эмбриона, свыше двух эмбрионов переносят при отрицательных предыдущих попытках и низком качестве эмбрионов. Для переноса более 2-х между клиникой и пациентом заключается дополнительное соглашение.
Источник
Все этапы культивирования эмбрионов контролирует эмбриолог.
После слияния генетического материала (ДНК) яйцеклетки и сперматозоида образуется зигота. Первый клеточный цикл деления является самым длинным и занимает около 24 часов.
Полученные две равноценные клетки называют бластомерами.
Бластомеры — клетки, изначально идентичные по структуре, биохимии и потенциалу развития. Они обладают замечательным свойством — способностью образовывать в последующем любые клетки тела. Однако, такая способность теряется на стадии 8 бластомеров, т.к. далее бластомеры приобретают специализацию. В силу этого, повреждения эмбриона, возникшие на стадии до 8 бластомеров, легко компенсируются.
В это же время возможно разделение эмбриона на 2 и более части, дающие начало однойяцевым близнецам…
Впоследствии дробление эмбриона продолжается.
На 2-е сутки (48 час.) после пункции — стадия 2-4 бластомера (возможно и 6-8 бластомеров).
Часть эмбрионов в это время может отставать в развитии либо прекращает деление полностью.
На 3-4 е сутки — 6-8 бластомеров ( возможно 8-16).
При достижении стадии 12-14 бластомеров эмбрион приобретает шаровидную форму с гладкими контурами и называется морулой.
В естественных условиях эмбрион попадает в матку именно на этой стадии.
На 5-е сутки -бластоциста (т.е. более 16 бластомеров).
Бластоциста на 5 сутки выходит из своей оболочки, происходит естественный хэтчинг (выклев).
Оболочка к тому моменту уже истончена и растянута, через небольшой разрыв бластоциста освобождается и приступает к имплантации.
Возможность культивирования до стадии бластоцисты открывает большие возможности при отборе лучших эмбрионов, делает более физиологичным момент попадания эмбриона в матку, а также повышает процент имплантации.
Часто наши пациентки слышат о так называемом качестве эмбрионов. Что это?
Эмбрионы оцениваются по форме и наличию или отсутствию фрагментации, скорости их дробления и, как следствие, предположительной способности имплантации (прикрепление эмбриона в матке после переноса).
класс 1 (А) — отличное качество эмбрионов.
Для них характерны:
– наибольшая скорость дробления,
– правильная форма бластомеров, четкие контуры,
– отсутствие безъядерных фрагментов,
а значит, высокая способность имплантации.
класс 2 (В) – хорошее
неровные бластомеры и/или неровные фрагменты цитоплазмы менее 10% объема
высокая способность имплантации
класс 3 (С) -удовлетворительное
наличие фрагментации 10-50%
класс 4 (D) – неудовлетворительное
наличие фрагментации более 50%
К сожалению, в мире нет единой принятой системы оценки «качества» зародыша. Как правило, учитываются следующие показатели: количество клеток, упорядоченность их расположения, степень фрагментации, толщина оболочек вокруг эмбриона и т.п.
Обычно качество зародыша оценивается не ранее чем через 48 часов после извлечения яйцеклетки. К этому сроку (к концу второго дня) должно быть не менее двух клеток, лучше, если эмбрион состоит из 3-4 клеток. Через 72 часа (к концу третьего дня) эмбрион должен состоять по крайней мере из 6 клеток, а лучше — из 7 и более. В целом больше шансов выжить у эмбрионов, состоящих из большего числа клеток, упорядоченно расположенных и при отсутствии фрагментации. Качество эмбрионов оценивается под микроскопом в ЭКО-лаборатории, что позволяет прогнозировать вероятность развития беременности после переноса эмбриона. Однако в данный процесс вмешивается еще множество факторов, которые на современном уровне развития науки невозможно учесть, поэтому полученные прогнозы не всегда сбываются.
Эмбрионы, полученные после оплодотворения ооцитов одной и той же пациентки, часто отличаются по скорости дробления и морфологическим парамет¬рам. Общепризнанным считается, что максимальную способность к имплантации имеют эмбрионы с наибольшей скоростью дробления, бластомеры которых имеют регулярную форму, а безъядерные фрагменты отсутствуют. Такие эмбрионы относят к классу 1 (А). Градация эмбрионов по качеству является условной и различается в разных лабораториях. Однако в ос¬нове ее лежит, как правило, характер фрагментации эмбриона, форма и размер бластомеров. Так, эмбрион с неравными бластомерами и/или фрагментами ци¬топлазмы, занимающими менее 10% объема, соответ¬ствует классу 2 (В); при наличии фрагментации 10 50% классу 3 (С), более 50% классу 4 (D).
Работы по анализу влияния качества переносимых в полость матки эмбрионов на частоту их имплантации многочисленны, но трудносопоставимы в силу разных методик оценки качества. Около 20% переносимых эмбрионов А-В класса имплантируются, однако эта частота падает до 1,5% для сильно фрагментированных эмбрионов. Впечатляют результаты клиники Bourn Hall (Англия), в которых показано, что 90% пациенток, забеременевших после ЭКО и ПЭ, по¬лучали при переносе эмбрионов хотя бы один эмбрион класса А. В той же работе не было выявлено зависимости между качеством переносимых эмбрионов и частотой невынашивания беременности.
Причинами плохого качества эмбрионов могут быть
плохое качество спермы или плохое качество яйцеклетки. Считается, что если эмбрион плохо растет изначально, то проблема в яйцеклетке, а если развитие первые двое суток идет хорошо, а потом начинаются проблемы, то дело в плохом качестве спермы.
Классификация бластоцист.
Существует несколько классификаций бластоцист, но все они похожи. Качество бластоцисты определяется тремя основными параметрами – размером (объемом полости бластоцисты), качеством внутренней клеточной массы (клтеки, дающие начало всем тканям будущего зародыша) и качеством трофэктодермы (клеток, дающим в последствии начало всем внезародышевым оболочкам – хориону, плаценте. Также отмечается наличие/отсутствие естественного хэтчинга – точечного разрыва оболочки эмбриона и выклева бластоцисты из нее.
Цифрами обозначается размер бластоцисты – стадия ее экспансии.
1 – ранняя, полость около половины объема бластоцисты;
2 – средняя, полость более половины объема, но размер бластоцисты не сильно больше размера дробящегося эмбриона;
3 – экспандированная бластоциста – полость занимает большую часть объема бластоцисты, блестящая оболочка истончена, объем бластоцисты в 2 и более раза превышает объем дробящегося эмбриона;
4 – бластоциста, вступившая в естественный хэтчинг (выклев);
5 – бластоциста в хэтчинге после проведения ПГД;
6 – полностью вылупившаяся бластоциста.
Первая буква обозначает качество внутренней клеточной массы – массы клеток, из которой в будущем будет развиваться сам эмбрион.
А – плотно упакованная, достаточная по размеру ВКМ, хорошо различима, отсутствуют включения, вакуоли, тяжи и пр.;
B – ВКМ хорошо различима, но имеет незначительные дефекты (небольшой объем, неплотно упакована, мало клеток, есть включения и т.п.);
С – ВКМ либо неразличима, либо имеет серьезные нарушения в структуре;
D – дегенеративная ВКМ.
Второй буквой аббревиатуры обозначается качество трофобласта – клеточного слоя, полностью окружающего бластоцисту. Впоследствии из него разовьются все внезародышевые оболочки эмбриона, он отвечает за внедрение эмбриона в стенку матки – имплантацию.
А – трофобласт хорошо организован, многоклеточный и однослойный;
В – трофобласт состоит из нескольких слоев клеток, клетки распределены неравномерно либо клеток меньше, чем в норме;
С – трофобласт состоит из небольшого числа клеток, либо имеет включения, вакуоли, тяжи и иные отклонения от нормы;
D – дегенеративный трофобласт.
Источник
Результаты экстракорпорального оплодотворения зависят от огромного количества факторов, однако именно эмбриологический этап процедуры имеет важнейшее, практически определяющее результат, значение.
Проведение манипуляций с человеческими эмбрионами, имеющими микроскопические размеры – это сложная область медицины. Поэтому в процессе работы врачи используют сложную терминологию. В данной статье Апрышко Валентина Петровна, заведующая лабораторией эмбриологии одной из московских клиник, расскажет о методах и критериях оценки качества эмбрионов.
Самостоятельно принимать решения, связанные с выбором эмбриона или даты его переноса в матку могут только специалисты-эмбриологи. Однако после прочтения данного материала вы начнете понимать медицинские обозначения типа «8С».
День первый
Сразу после оплодотворения доктор проверяет признаки того, что процедура ИКСИ, ПИКСИ или ЭКО проходит успешно. Для этого он смотрит, как выглядят пронуклеусы, и оценивает их:
- наличие;
- количество;
- внутреннюю структуру;
- симметричность;
- внешний вид.
Пронуклеусы – это ядра половых клеток (мужских и женских), которые еще не слились. Изучая их вид, можно оценивать перспективы, качество и жизнедеятельность будущих эмбрионов.
Критерии нормы:
- пронуклеусов должно быть два;
- они должны располагаться рядом;
- их размеры должны быть одинаковыми;
- внутри должны визуализироваться «ядрышки» (пронуклеоли);
- «ядрышки» должны иметь правильное расположение и количество.
На данном этапе развития эмбрионов может формироваться множество патологий, которые ведут к их гибели. Например:
- присутствие одного пронуклеуса вместо двух (оплодотворение не состоится);
- наличие трех пронуклеусов (эмбрион нежизнеспособен, так как будет иметь тройной хромосомный набор).
Плохие эмбрионы сразу отбраковывают. Нет смысла их пересаживать. Даже если они не погибают на этапе культивации, организм женщины сам отторгает такие зародыши. В результате если беременность наступает, она очень быстро прерывается. Это происходит уже в первые недели гестации.
Гестация, гестационный возраст новорожденного (от лат. gestatio ношение) — количество полных недель беременности, прошедших между первыми сутками последней менструации роженицы и моментом перерезания пуповины во время родов.
День второй
На второй день культивации клетка делится на две. Образуются бластомеры.
Бластоме?ры — клетки эмбрионов на этапе дробления. Оплодотворенная яйцеклетка делится на две дочерние клетки, называемые бластомерами. Каждый бластомер делится на две новые дочерние клетки, которые также получают название бластомеров.
Критериями качества эмбриона на данном этапе являются его:
- размеры;
- форма;
- степень фрагментации (объем, который внутри эмбриона занимают безъядерные элементы цитоплазмы);
Чем больше внутри эмбриона бластомеров и чем меньше степень фрагментации, тем более качественным он считается. Такой зародыш имеет большой потенциал к дальнейшему нормальному развитию.
Многие эмбриологи используют классификацию, отражающую качество эмбрионов с помощью четырех букв латинского алфавита. Вот эта классификация:
- А – безъядерных фрагментов нет, высококачественный эмбрион;
- В – фрагментация до 20%, эмбрион среднего качества;
- С – содержание безъядерных элементов цитоплазмы больше 20%, но не достигает 50%, эмбрион удовлетворительного качества;
- D – количество ануклеарных (безъядерных) фрагментов цитоплазмы превышает 50%, такой эмбрион считается некачественным.
Также в этой классификации используются цифры, которые отражают количество бластомеров. Чем их больше, тем продукт слияния мужской и женской половых клеток считается лучше. Например, эмбрион «4В» оценивается более высоко, чем «3С». Ведь в нем больше бластомеров и меньше фрагментация.
День третий
Нормальный эмбрион на третий день развития имеет от 7 до 9 бластомеров. Он уже начинает выполнять заложенную в нем генетическую программу.
На данном этапе многие зародыши прекращают свое развитие. Это происходит по причине наличия дефектов генетического материала.
«Блок развития» – так называют эмбриологи явление, которое обеспечивает естественный отбор. Процесс размножения весьма сложен. В ДНК часто случаются поломки. «Поломанные» эмбрионы останавливаются в развитии.
Оценка их качества происходит точно так же, как на второй день. Используется аналогичная классификация. Только бластомеров становится больше. Поэтому описываются они, например, как 8А.
День четвертый
Если бы развитие эмбриона происходило в естественных условиях, он попал бы в полость матки на четвертый день после оплодотворения. До этого времени он находится в маточной трубе.
На четвертый день зародыш состоит из 10-16 бластомеров. Он становится более компактным – занимает небольшой объем относительно количества клеток. Его поверхность выглядит более гладкой, чем на третий день.
Морула – так называется стадия развития эмбриона на данном этапе. В переводе это означает «тутовая ягода». Так эмбриологи назвали его именно за внешнее сходство с этой ягодой.
Заканчивается данная стадия кавитацией. Так называется процесс образования полости внутри эмбриона.
День пятый
На пятый день развития эмбрион достигает стадии, которая называется бластоциста. Это значит, что полость внутри эмбриона уже достигла 50% от его общего объема.
В отличие от предыдущих стадий развития, бластоциста состоит из разных клеток:
- Трофобласт. Находится снаружи. Эта часть эмбриона отвечает за его внедрение (имплантацию) в слизистую оболочку матки. Из него будет развиваться плацента и прочие внезародышевые оболочки.
- Эмбриобласт. Находится внутри. Из этих клеток в дальнейшем сформируются органы и ткани плода.
Именно на этой стадии в большинстве случаев врачи пересаживают эмбрион в матку женщины. Также их можно замораживать. Это делают, чтобы сохранить «лишние» эмбрионы на следующий цикл.
Весь эмбрион окружен блестящей оболочкой. После переноса эта оболочка разрывается. Бластоциста выходит наружу и встраивается в стенку матки. Этот процесс называется hatching, что означает «вылупление».
Некоторым супружеским парам проводят преимплантационную диагностику для раннего выявления хромосомных и генетических мутаций. В таком случае ПГД делают именно на данном этапе, когда часть клеток начинает выступать за внешнюю оболочку.
На данном этапе развития критериями качества эмбриона являются:
- размер внутренней полости;
- степень проникновения эмбриона за оболочку;
- количество и плотность клеток.
Размер внутренней полости оценивается цифрами, два других критерия – буквами.
Исходя из размеров, выделяют шесть степеней зрелости бластоцисты:
- 1 – полость внутри эмбриона менее 50% (ранняя бластоциста);
- 2 – полость внутри эмбриона более 50% от его объема;
- 3 – полость занимает весь объем эмбриона;
- 4 – полость увеличивается, а оболочка эмбриона становится тоньше (расширенная бластоциста);
- 5 – трофэктодерма (наружный слой бластоцисты) проникает сквозь блестящую оболочку;
- 6 – бластоциста «вылупляется» и покидает оболочку.
Клетки качественного эмбриона должны быть сгруппированными. Представьте себе теннисные мячики, которые упакованы внутри футбольного мяча. Чем их больше, и чем плотнее расположены, тем лучше эмбрион.
Данный параметр отражается буквами:
- А – плотно упакованный «футбольный мяч» с большим количеством клеток;
- В – среднее количество клеток внутри бластоцисты;
- С – малое количество клеток.
Оценивается также трофэктодермальный слой. Продолжая аналогию, можно сравнить его с кожей, из которой пошит футбольный мяч. Чем меньше сегментов (клеток), и чем плотнее они расположены, тем лучше.
Данный параметр тоже оценивается буквами латинского алфавита:
- А – много клеток;
- В – среднее количество клеток;
- С – мало клеток.
Соответственно, общая характеристика эмбриона отображается цифрой и двумя буквами. Например, запись 4АА означает, что эмбрион находится на стадии расширенной бластоцисты, внутри содержится много клеток, и снаружи его трофэктодерма тоже представлена большим количеством клеток.
Процесс развития эмбриона очень сложен. Процедура ЭКО считается удачно проведенной, если хотя бы 40% из них на пятый день развития достигли стадии бластоцисты хорошего качества.
Один или два эмбриона переносятся в матку. Остальные можно заморозить. Если текущий протокол ЭКО не завершится беременностью, их можно будет использовать в следующем цикле. В клинике ЭКО при заморозке используется метод витрификации, то есть сверхбыстрого замораживания, что позволяет защитить эмбрионы от повреждения кристаллами льда.
Источник